Gentechnik

© 2002-2007 Hans-Dieter Mallig  (hdm)
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Ligase
DNS-Fragmente mit 'sticky ends', durch Restriktionsendonucleasen aus DNS geschnitten, können sich aufgrund ihrer 'klebrigen Enden' über Wasserstoffbrücken zu längeren Stücken aneinander lagern. Diese zusammengesetzten Fragmente sind jedoch hitzeempfindlich und können bei Temperaturerhöhung wieder auseinanderfallen.

Zwei DNA-Fragmente mit den gleichen sticky ends können sich aneinander lagern.

Bei den Pfeilen sind die Nukleotide noch nicht fest verbunden.

Die Ligase hat die DNA-Fragmente kovalent verknüpft.
Das Enzym Ligase kann aber die aneinanderstoßenden Enden der 'Holme' der 'DNS-Leitern' fest verbinden, so dass sie bei Temperaturerhöhung nicht mehr getrennt werden können. Die Enden der DNS-Fragmente werden durch die Ligase kovalent miteinander verknüpft, so dass stabile Moleküle entstehen.
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