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© 2002-2007 Hans-Dieter Mallig (hdm) |
Nachdem die DNA denaturiert vorliegt, kann jetzt eine Gensonde, eine radioaktiv markierte einsträngige DNS oder RNS, die zum gesuchten Gen oder einem Gen-Teil komplementär ist, hinzu gegeben werden. Die Gensonde und die komplementäre DNA binden sich über Wasserstoffbrücken. (Hybridisierung zwischen der Bakterien-DNA einzelner Kolonien und der Sonde. Das hier beschriebene Verfahren heißt Kolonie-Hybridisierung ist eine sehr häufig angewendete Methode.) Die restliche Gensonde wird abgespült.
Gensonde wird zur Membran mit der denaturierten DNA gegeben
Die mit Gensonde behandelte Nylon-Membran.
(Mit bloßem Auge ist die markierte Kolonie natürlich nicht zu erkennen.)Gibt man einen röntgenempfindlichen Film auf die behandelte Membran, so schwärzt er sich über den Kolonien mit radioaktiv markierten Sonde.
röntgenempfindlicher Film(Film anklicken.) Bakterien dieser Kolonien kann man auf dem ursprünglichen und unbehandelten Nährboden isolieren und klonieren.
Jetzt solltest du die folgenden Fragen beantworten können:
Was versteht man unter einer Gensonde?
Wozu verwendet man Gensonden?Wie heißt das hier beschriebene Verfahren?
Warum muss man statt Agar-Agar eine Nylon-Membran verwenden?
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